【用蔬果作口服疫苗 】
“可食性”疫苗和植物生物技術
資料表明,有很多可食用植物品種,包括蕃茄、馬鈴薯、黃瓜等。是可以接受人為植入的外源基因的。如用於作識別標誌的,或是具有特殊用途的感興趣基因
(30-38)。當前,已有眾多的方法被採用來製備轉基因的植物。直接基因轉入技術,如聚乙二醇 (PEG) 介導的 DNA 轉入法,往植物的器官組織或培養的細胞中輸入外源基因的微注射法、電脈沖法、微粒轟摯法以及其它多種新方法
(39-43)。在這些方法中,農杆菌介導的基因轉移在高等植物的轉化中被採用的最為普遍 (44-49)。當外源基因被成功地導入植物的基因組後,隨著新一代植物的生長,由新導入的外源基因所賦予的特徵也將表現出來。
致瘤農杆菌 (A. tumefaciens) 是一種土壤細菌它們可以通過植物的損傷處來感染植物,易感植物包括大量雙子葉植物和裸子植物,以及一些單子葉植物。被感染後的植物組織出現瘤型病變。在感染過程中,經由致瘤質粒
(Ti Plasmid) 攜帶的轉移 DNA (TDNA) 的外源基因進入易感染植物的核基因組中並與之整合。這一過程需在所感興趣的基因兩端具有
T-DNA 的邊界序列。此外,還需要保持由 Ti 質粒和農杆菌染色體所決定的致病能力。T-DNA 兩端的定位與復制子相適應,使這同一結構既能在大腸杆菌中,也能在農杆菌中運作。若將供選擇之用的標記基因取代
T-NDA 編碼的基因。還可以檢測到重組的基因是否被轉入進植物基因組。一旦預期的轉基因植物被選擇到,就可採用微繁殖的技術,將某一克隆株擴增為幾百萬株。利用植物種子以達到擴增的目的是同樣可行的。
從 1989 年開始,在德克薩斯州康羅市,林文杰教授與他在生達實業公司和農墾有限公司的同行們在轉移基因植物內使多種抗原得到表達。這些植物包括煙草、蕃茄和馬鈴薯。另外一個進行此項目的研究小組是由
C.J. Amtzen 領導的。這個小組利用轉基因的植物表達了數種致病原的抗原性基因,包括致腸道腹瀉的諾瓦克 (Norwalk)
病毒和大腸杆菌 (E. coli) 的不耐熱性腸毒素 (20,21)。另外,C. urtiss 和 c. ardineau 也就用轉基因煙草植物來生產大腸肝菌和變異鏈球菌的細菌抗原而發表了專利申請文章。
一種預防乙型肝炎的候選“可食性”疫苗
乙肝有很長的歷史,但第一次有記載的大流行發生於 1883 年。美國疾病控制中心 (CDC) 的估計,僅在美國,每年就有 20
萬的新病歷被診斷並造成了每年約有 5000 人因慢性肝炎而死亡。
乙肝病毒 (HBV) 是一種 42nm 的有包膜的病毒,屬肝炎病毒族的成員 (52)。雖然在體外培育該病毒尚未成功,但對它的生物化學和生物物理特性的研究已有許多的報導
(53)。病毒顆粒外表面的主要糖蛋白被稱之為乙型肝炎表面抗原 (HBsAg),其主要成分是由 226 個氨基酸所構成的插在脂性包膜中的穗狀抗原。在乙肝患者的血清中,可以看到由穗狀抗原和少量其它蛋白質所組成的不完全球形和管狀形的亞病毒顆粒。
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