【用蔬果作口服疫苗 】

目前所用的重組性乙肝疫苗主要就是由表面抗原組成。在許多國家都可得到。一般要求在 4-6 個月的時期中作 3-4 次注射接種。在大多數國家中，每次注射所使用的疫苗本身就需要花費 20 到 120 美元。很顯然，高昂的費用與多次的注射使許多人，特別是那些生活在發展中國家和貧窮地區的人們，無法得到免疫接種的機會。根據報導，全球範圍內，攜帶乙肝病毒的人數可能已超過 3 億。由於以上原因，我們於 1989 年決定首先用乙肝病毒表面抗原的編碼基因來檢驗植物產生疫苗的設想的可能性。生達藥物集團、農墾公司和德克薩斯州農工大學的科學家們製備了帶有 HBsAg 編碼基因的質粒載體，借助於農杆菌介導的植物轉化技術，成功地轉化了煙草植物，使之能將植物來源的重組 HBsAg 表達在其葉子中。進一步的實驗結果表明，植物來源的 rHBsAg 能被抗人類血清來源的 HBsAg 的單克隆抗體所識別 (12)。採用離心的辦法，可以回收植物來源的顆粒狀重組蛋白。與當前商業用途的、經由酵母菌產生的顆粒狀重組蛋白相比較。有著相同的外觀。這種煙草植物來源的 rHBsAg 自我組裝成平均直徑約 22nm 的顆粒，這與由酵母菌中表達出來的重組病毒顆粒幾乎完全相同 (54)。我們進一步比較了分別由植物、酵母菌以及乙肝患者血清來源的表面抗原顆粒，結果表明這三種不同來源的病毒顆粒在蔗糖梯度和氯化銫梯度離心分析中顯示了類似的物理特徵 (12)。以上觀察結果的重要意義在於；其一，顆粒形式的重組蛋白質抗原要比單純的�閫顙膇K疫原性；其二，我們首次證明了轉基因植物在合成 rHBsAg 之後，具有與酵母菌系統相同的能力。以某種類似的機制將其組裝為顆粒狀。而目前廣泛使用的乙肝疫苗正是通過上述的酵母菌系統生產的。

在煙草方面最初研究的鼓舞下 HMason. Y. Y. Lam. C. Froberg. 和 D. M. K. Lam（林文杰教授）開始用 HBsAg 基因轉染蕃茄植物。1994 年，他們生產出世界上首例侯選植物來源的乙肝“可食性”疫苗。在轉基因改造後的蕃茄植物果實中，可檢測出 rHBsAg 的存在 (50)。這一結果的獲得，是通過採用農杆菌介導的基因轉移技術，用攜帶 HBsAg 編碼基因質粒去轉化普通的蕃茄植物而實現的。該基因在植物細胞中的運作是由與其連接的 35S 菜花鑲嵌病毒的啟動子所控制。直接組織放射免疫測定可顯示植物所達表的 rHBsAg 在蕃茄的葉子和果實中的定位。利用轉基因後的蕃茄植物來大規模生產 rHBsAg 的工作和有關進一步的免疫學研究都正在進行之中。

對於植物來源的 rHBsAg 的免疫原性的初步研究，最近已有報導 (55)。從煙草葉子提取，並經部分純化後的 rHBsAg 能刺激試驗老鼠體內的 B- 和 T- 淋巴細胞發生免疫應答。兩組試驗老鼠。在二周內均分別接受 3 次從植物葉或酵母菌中合成的含 rHBsAg 的製劑，每針劑量為 0.5 毫克。距最後一次抗原注射一周後，在兩組鼠的血液中均測到有抗 rHBsAg 的抗體。其抗體定量在二組鼠中也是相似的。體外實驗進一步表明，煙草植物和酵母菌二種不同來源的 rHBsAg 具有類似的抗原決定族。二者能交互引起 T- 淋巴細胞的免疫應答。以上觀察提示，從轉基因煙草中產生的 rHBsAg 恰當地保持了其誘發機體 B- 和 T- 淋巴細胞產生應答的免疫學性質。