【生物工程 - 林文傑教授】
 

用蔬果作口服疫苗

一種預防菌痢的候選性“可食”疫苗

目前使用的預防菌痢和傷寒的疫苗有數種類型。它們或是由滅活的完整細菌細胞,或是由細菌毒素的亞單位,或是由減毒處理過的存活細菌為基礎所構成。

大腸杆菌 (E. coli) 可引起嚴重的腹瀉,其導致腹瀉的機制可能有所不同。但一種或數種由該菌產生的腸毒素在致病中充演了重要角色。其中之一的熱不穩定性腸毒素 (LT),其理化性質與免疫學性質都與霍亂菌的腸毒素密切相關。這兩種腸毒素之間,或它們的亞單位之間的類似性使得對它們中任何一種的免疫預防,同時也能對另一種發生作用,即存在著交叉免疫的效果 (64,65)。對於腸毒素分子結構模型的研究,對這種交叉免疫效果提供了詳細的解釋 (66)。利用大腸杆菌的熱不穩定性腸毒素 B 亞基表面抗原來發展疫苗,以預防這些疾病,是具備可能性的。T. A. Haq 以及同事們將帶有 TL-B 編碼基因的 DNA 轉移到煙草和馬鈴薯植物中,並成功地觀測到了該基因的 DNA 轉移到煙草和馬鈴薯植物中,並成功地觀測到了該基因在植物中的表答和抗原的積累 (21)。

這一過程所採用的方法與前面已提及幾例所採用的方法一樣,也是在農杆菌介導下完成的植物轉化。LT 的 B 亞基本身並不具毒性,只是充當結合受體的作用。動物喂飼實驗是分別給兩組實驗鼠飼以由煙草中提取的,或是由大腸杆菌中提取的抗原成份。在 25 天之中,實驗動物共接受 4 次喂飼。每次給每只 12.5 毫克的抗原。最後一次喂飼後的第三天,從每只實驗動物取血清和小腸黏膜樣品。

血清和腸黏膜的取樣結果分析表明,血清抗體的水平在兩組鼠中相似,黏膜抗體的水平有所不同。植物來源的抗原喂飼組僅是大腸杆菌對照組的三分之一,不過其產生的黏膜抗體仍是對 LT-B 特異性的 (21)。毒性中和實驗證實了血清及黏膜抗體的免疫保護性質,以含 LT-B 的馬鈴薯喂飼的一組實驗老鼠也顯示了相同的結果,在第 0,4,14 和 18 天,實驗鼠喂飼了含 20 毫克的 rLT-B 的馬鈴薯。對照組,則僅給予 5 毫克大腸杆菌性的 rLT-B。最後喂飼後第 10 天,分別作了血清黏膜取樣。血精 1gG 水平與黏膜 1gA 水平在二組均被檢測到。同樣地,對照組所表現的抗體水平比較高。關鍵的是,馬鈴薯中的重組抗原能引起實驗動物的口服後的免疫反應。從而,再一次證明了植物性口服疫苗的可行性。

轉基因動物產生的單克隆抗體被用於被動免疫的嘗試

大量研究已經表明了在原核生物細胞中合成完整抗體分子,或者是抗體分子中的抗原結合片斷,單鏈 Fv 抗體,以及 VH 鏈等的能力 (67-71)。有關對免疫球蛋白結構的解釋和在原核生物細胞中表達抗體或抗體成份的而積累的詳盡知識,為植物來源的抗體的出現奠定了基礎。最近已有系列報導關於利用轉基因植物產生免疫球蛋白的方法 (72-74)。包括有倫敦蓋斯醫院的 J.ma,聖地亞哥植物生物技術研究所的 A. Hiatt,拉華拉的斯克利普斯研究院的 M. Hein,以及他們的同事在內的一個研究組,利用轉基因植物成功地獲得了某種黏膜分泌型抗體。該抗體具有抗御一種導致齲齒的鏈球菌變株的作用 (22)。

 

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